小鼠T淋巴細胞 (CTLL-2)
細胞介紹
該細胞是源自C57BL/6的細胞毒性的T淋巴細胞，其生長依賴IL-2。
 
細胞特性
1)來源：T細胞
2)形態(tài)：懸浮生長
3)含量：>lxl06個/mL
4)污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規(guī)格：T25瓶或者lmL凍存管包裝
 
運輸和保存：使用含有胎牛血清的2ml凍存管發(fā)送存活細胞。收到細胞后，可在1000RPM，常溫條件下，離心5min后，于潔凈操作臺棄去上清，加入推薦 使用的培養(yǎng)基后轉(zhuǎn)移至l〇cm培養(yǎng)皿或者T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時，再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。
細胞用途：僅供使用。
 
小鼠T淋巴細胞 (CTLL-2)細胞培養(yǎng)步驟
1)培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1.準備 RPIVM-1640 培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO)，80%;補充 2mM的L-谷氨酰胺，ImM的丙酮酸鈉；另外添加250U/mlrmlL-2(recombinantmouseInterleukin 2)，添加ConA的T-STIM (BDPharmingen,貨號354115)，10%;胎牛血清，10%。
2.培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%;二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱 濕度為70%-80%。
3.凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
2)細胞處理：
復(fù)蘇細胞：將含有l(wèi)mL細胞懸液的凍存管在37°C水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加l-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入l〇cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢 查細胞密度。
細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加l-2mL培養(yǎng)液后吹句，將細胞懸液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培 養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細 胞懸液按1: 2到1: 3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
 
細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時，應(yīng) 將細胞收集，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，少量保存上清液（防止細 胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，吹打均勻后，加入到凍存管中，在凍存管 中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。
 
小鼠T淋巴細胞 (CTLL-2)注意事項：
收到細胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰己揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們電聯(lián)。
所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。