1.收到細(xì)胞，di一時(shí)間要鏡檢：調(diào)查細(xì)胞形態(tài)是否正常，關(guān)于貼壁細(xì)胞則要留意看貼壁狀況是否很好，調(diào)查細(xì)胞密度，有疑議及時(shí)咨供給細(xì)胞的技術(shù)人員。由于運(yùn)送的時(shí)間或許溫度的改變，許多貼壁細(xì)胞在盛滿(mǎn)培育基的瓶子里成長(zhǎng)的狀況平和時(shí)會(huì)有點(diǎn)不一樣，主要是貼壁結(jié)實(shí)問(wèn)題。比如293T，平常貼壁就不是很牢，在裝滿(mǎn)的培育基瓶子里邊，會(huì)發(fā)生大片的脫落，細(xì)胞集合在一起，但是細(xì)胞成長(zhǎng)還是正常的，經(jīng)過(guò)離心搜集，加以胰酶的消化，從頭打散，又能夠正常的貼壁成長(zhǎng)。
2.當(dāng)經(jīng)過(guò)上一步的調(diào)查，細(xì)胞初步?jīng)]有任何問(wèn)題時(shí)，進(jìn)行下一步操作。當(dāng)收到的細(xì)胞密達(dá)到80%左右時(shí)，則處理如下：棄除瓶中大部分培育基，僅保留5到10mL培育所需的慣例培育基；或更換新鮮的培育基，置于培育箱中，隨后每天調(diào)查。細(xì)胞在低于正常成長(zhǎng)溫度狀況下，會(huì)調(diào)整為停止期，或許慢速成長(zhǎng)期，有必要康復(fù)37度的環(huán)境至少3個(gè)小時(shí)左右，才能從頭調(diào)整到接近對(duì)數(shù)成長(zhǎng)期的狀況，在對(duì)數(shù)成長(zhǎng)期進(jìn)行細(xì)胞的傳代會(huì)大大增加傳代的成功率，和細(xì)胞的存活率。
3.如果經(jīng)di一步調(diào)查發(fā)現(xiàn)細(xì)胞密度超越90%，而且細(xì)胞狀況很好時(shí)，則復(fù)溫后2個(gè)小時(shí)需求立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細(xì)胞而定。關(guān)于成長(zhǎng)比較快，狀況安穩(wěn)，不易受外界影響的細(xì)胞能夠一次多傳幾瓶；關(guān)于成長(zhǎng)較慢，細(xì)胞比較薄，狀況容易動(dòng)搖的細(xì)胞類(lèi)型，一次少傳些，保證每瓶細(xì)胞密度大些，便于安穩(wěn)成長(zhǎng)。至于一些比較生疏的細(xì)胞，di一次處理也能夠按照第二種狀況。
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